在体内并非所有具有相同催化作用的酶，都是同一种蛋白质。在不同器官中，甚至在同一细胞内，常常含有几种分子结构不同、理化性质迥异、但却可催化相同化学反应的酶。这类具有相同催化功能，但酶蛋白的分子结构、理化性质和免疫学性质各不相同的一组酶称为同工酶。乳酸脱氢酶是由4个亚基组成的蛋白质。
组成LDH的亚基有两种类型，一种是主要分布在心肌的H型亚基，另一种是分布于骨骼肌、肝的M型亚基。存在于心肌中的主要LDH由4个H亚基构成(LDH1)，存在于骨骼肌、肝中的LDH主要由4个M亚基构成(LDH5)。在其他不同组织中所存在的LDH中，H亚基与M亚基组成比例各有不同，可组成H4(LDH1)、H3M(LDH2)、H2M2(LDH3)、HM3(LDH4)及M4(LDH5)5种LDH同工酶。这一次序也是它们向正极电泳速度递减的顺序，可借以鉴别这5种同工酶。这5种同工酶在各器官中的分布和含量不同，各器官组织都有其各自特定的分布酶谱。心肌富含H4，故当急性心肌梗死时或心肌细胞损伤时，细胞内的LDH释人血中，同工酶谱分析表现为H4增高，可辅助该病的诊断。