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生物化学

酶活性测定方法

酶活性测定方法(一)按反应时间分类法：20世纪50年代以前大都使用固定时间法。这种方法是以酶催化反应的平均速度来计算酶的活性，现多已不用。50年代中期开始采用连续监测法。这种方法用自动生化分析仪上完成，可以测酶反应的初速度，其结果远比固定时间法准确，在高浓度标本尤为明显，但本法也受到反应时间，反应温度，试剂等的影响，应加以注意。1)定时法：通过测定酶反应开始后某一时间段内(t1到t2)产物或底物浓…
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酶活力测定的影响因素

1.反应速度大多数酶促反应是可逆反应，其速度既受底物浓度的影响，也受产物生成量的影响。当底物浓度较高时，在反应的初期，其浓度变化甚微，产物生成量也很少，此时反应速度可看作是恒定的。酶反应动力学中所指速度就是反应的初速度。2.底物浓度米氏方程ν=νmax[S]/Km+[S]是反映酶促反应速度与底物浓度关系的方程式，其中Km称米氏常数。Km值是酶的特征常数之一，只与酶的性质有关，而与酶浓度无关。不同的…
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巨噬细胞

巨噬细胞(Mφ)来自血液中单核细胞，内含溶酶体，具有粘附能力和强大的吞噬功能。Mφ表面具有MHCⅠ类和Ⅱ类分子、IgGFc受体(FcγRI)、C3b受体和多种细胞因子受体。Mφ的主要生物学功能有：1.IgG抗体或C3b介导的免疫调理作用。2.在IgG抗体介导下，发挥ADCC效应杀伤靶细胞。3.加工处理和提呈抗原，激发免疫应答。4.分泌细胞因子(如IL-1、IL-12、IFN-γ和TNF-α等)和某…
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IgM的特性和功能

1.IgM主要由脾脏中浆细胞合成，为五聚体，有较高抗原结合价，也是分子量最大的Ig。2.IgM不能通过血管壁，主要存在于血液中，在补体和吞噬细胞参与下，其杀菌、溶菌、激活补体促进吞噬等作用均显著高于IgG，对防止菌血症发生具有重要作用。3.IgM是种属进化过程中最早出现的Ig，也是个体发育过程中最早产生的Ig，通常在胚胎晚期即可生成，因此若脐带血或新生儿血清中IgM水平升高，表明胎儿曾有宫内感染。…
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IgG的特性和功能

IgG是四链单体，占血清Ig总量的75%，是血清中含量最高的Ig，四个亚类。主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞产生，血清半衰期较长，约23天，故临床使用丙种球蛋白进行免疫治疗时，应以每2～3周注射一次为宜，广泛分布于细胞外液中。IgG是唯一通过胎盘的抗体，对防止新生儿感染起重要作用。IgG的功能有：1.激活补体经典途径，介导溶菌和细胞毒作用;2.介导ADCC效应;3.调理吞噬作用;4.结合SPA;5.中…
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IgA的特性和功能

虽然IgA仅占血清免疫球蛋白总量的10%～15%，但却是外分泌液中主要的抗体。IgA分两型：血清型IgA和分泌型IgA.血清型IgA为单体，主要存在于血清中;分泌型IgA(SIgA)广泛分布于粘膜表面及相应部位的分泌液如唾液、泪液、初乳和肠道等外分泌液中，是粘膜局部抗感染免疫的重要物质，由两个单体、一条J链和一个分泌片(IgAFcR)连接而成。单体IgA和J链由粘膜固有层中的浆细胞合成。分泌片由粘…
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IgE的特性和功能

1.IgE主要由粘膜固有层中的浆细胞产生，是种系进化过程中最晚出来的Ig，也是含量最低的一种Ig.但在过敏性疾病和某些寄生虫感染人血清中，特异性IgE含量显著增高。2.IgE为亲细胞抗体，可通过Fc段与具有相应受体(FcεR)的肥大细胞和嗜碱性粒细胞结合而使之致敏，当再次接触相应变应原时可引发Ⅰ型超敏反应。
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IgD的特性和功能

IgD仅占血清免疫球蛋白总量的0.2%，血清浓度约30ug/ml.在五类免疫球蛋白中，IgD的绞链区较长，易被蛋白酶水解，故其半衰期较短，仅3天。IgD分为两型：血清IgD的生物学功能尚不清楚;膜结合型IgD(mIgD)是BCR的重要组成成分，为B细胞分化发育成熟的标志。未成熟B细胞仅表达mIgM，成熟B细胞同时表达mIgM和mIgD，被称为初始B细胞，活化的B细胞或记忆B细胞的mIgD逐渐消失。
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自然杀伤细胞

自然杀伤细胞(NK)是一类未经预先致敏就能非特异性杀伤肿瘤和病毒感染靶细胞的淋巴细胞。1.NK细胞的表面标志NK细胞没有T、B细胞所特有的抗原受体。人类NK细胞表面标志有CD56、CD16、CD11a和某些与其活化或抑制有关的受体。上述标志不是NK细胞所特有的。NK细胞表面具有低亲和性IgGFc(FcγRⅢ，CD16)，能定向杀伤与IgC抗体结合的靶细胞，这种杀伤作用称为抗体依赖细胞介导的细胞毒作…
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BCR复合物的组成

BCR是B细胞表面能够特异性识别、结合抗原的结构，为膜表面免疫球蛋白(SmIg)。人外周血B细胞表面大多具有SmIgM和SmIgD两种受体分子。通常B细胞表面BCR与膜分子Igα、Igβ异二聚体以非共价键结合形成BCR-Igα、Igβ复合受体分子。Igα、Igβ异二聚体的主要功能是将BCR与抗原结合产生的活化第一信号传递到细胞内，诱导B细胞活化。SmIg也是鉴别B细胞的抗原性标志，可用荧火素标记的…
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免疫球蛋白的基本概念

1.免疫球蛋白(Ig)免疫球蛋白是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白，主要存在于血液和体液中，是B细胞受抗原刺激后产生的，具有抗体的各种功能。膜型Ig(mIg)是B细胞膜上的抗原识别受体。2.抗体(Ab)抗体是由浆细胞合成分泌的能与相应抗原结合，即具有免疫功能的球蛋白。抗体是重要的免疫分子，存在于血液和体液中，因此将抗体介导的免疫称为体液免疫。
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免疫球蛋白的结构

1.免疫球队蛋白的基本结构Ig单体由两条相同的重链和两条相同的轻链借链间二硫键连接组成。重链(H)近氨基端1/4或1/5区域内的氨基酸、轻链(L)近氨基端1/2区域内的氨基酸多变，称为可变区(V区)，该区内某些区段的氨基酸具有更大的变异性，称为超变区(HV区)。重链和轻链剩余部分的氨基酸组成和排列顺序相对稳定，称为恒定区(C区)。2.免疫球蛋白的功能区Ig多肽链分子通过反复折叠可行成若干球形结构，…
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免疫球蛋白的类型

1.免疫球蛋白的同种型(类、亚类、型和亚型)同种型是指同一种属所有正常个体免疫球蛋白分子共同的抗原特异性标志。Ig同种型抗原特异性因种而异，如用人某类Ig免疫动物获得抗人Ig抗体，能与任何一个人的该类Ig特异性，结合而不能与其他物种的Ig发生反应。同种型抗原决定簇存在于Ig恒定区，根据Ig重链或轻链恒定区同种型抗原决定簇的不同，可将Ig分为若干类、亚类、型和亚型。(一)类和亚类根据Ig重链恒定区肽…
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NK细胞的表面标志

NK细胞的表面标志NK细胞没有T、B细胞所特有的抗原受体。人类NK细胞表面标志有CD56、CD16、CD11a和某些与其活化或抑制有关的受体。上述标志不是NK细胞所特有的。NK细胞表面具有低亲和性IgGFc(FcγRⅢ，CD16)，能定向杀伤与IgC抗体结合的靶细胞，这种杀伤作用称为抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC)。
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免疫球蛋白的功能

1.免疫球蛋白V区的功能主要是特异性识别、结合抗原。由于Ig有单体、二聚体和五聚体，因此结合抗原表位的数目也不同。Ig结合抗原表位的个数称为抗原结合价。2.免疫球蛋白C区的功能(一)激活补体IgG1～3和IgM与相应抗原结合后，可因构型改变而使其CH2/CH3功能区内的补体结合点暴露，从而导致补体传统途径激活。IgG4、IgA和IgE与抗原结合后不能激活补体传统途径，但其凝聚物可激活补体旁路途径。…
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NK细胞的受体

NK细胞的受体(一)KAR(杀伤细胞活化受体)能广泛识别靶细胞表面的糖类配体，胞浆区有ITAM结构，可转导活化信号，使NK细胞活化产生自然杀伤效应。(二)KIR(杀伤细胞抑制受体)能识别自身组织细胞表面的MHCⅠ类分子并与之结合，产生抑制信号。该抑制信号在胞内起主导作用，能阻断杀伤信号的转导，保护正常的自身组织细胞不被破坏。(三)IgGFcR(FcγδR，CD16)可与结合在靶细胞上的IgG结合，…
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NK细胞的主要生物学功能

NK细胞的主要生物学功能NK细胞能够识别和杀伤突变的肿瘤细胞和病毒感染细胞，而对正常自身组织细胞无细胞毒作用。NK细胞通过自然杀伤作用、ADCC效应，释放穿孔素、颗粒酶及细胞因子发挥生物学功能，其主要生物学功能具有抗感染、抗肿瘤的作用，同时NK细胞具有免疫调节作用。IL-2和IFNγ可增强NK活性;活化NK细胞又可分泌IL-2、IFN-γ和GM-CSF等细胞因子影响机体免疫功能，因此又是一种具有免…
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内源性抗原呈递过程

内源性抗原呈递过程内源性抗原是指细胞自身合成的抗原，如肿瘤抗原和病毒蛋白抗原等。内源性抗原在细胞内生成后，可被存在于胞质中的蛋白酶体，即小分子聚合多肽体(LMP)降解成小分子多肽;小分子多肽与热休克蛋白70/90在胞质内结合后，经抗原肽转运体(TAP)转运到内质网中，通过加工修饰成为具有免疫原性的抗原肽;抗原肽与内质网中合成的MHCⅠ类分子结合，形成抗原肽-MHCⅠ类分子结合形成抗原肽-MHCⅠ类…
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抗原呈递细胞的种类

抗原呈递细胞的种类可分为专职APC和非专职APC.专职APC是指一类特化的细胞，它们具有摄入、加工、处理、提呈胞外抗原，激活CD4+T细胞，诱导免疫应答的能力。这类细胞必须表达MHC-Ⅱ类分子、协同刺激信号分子和各种粘附分子。专职APC包括单核-巨噬细胞、树突状细胞、内皮细胞和B细胞。通常情况下则表达MHC-Ⅱ类分子、协同刺激信号分子和各种粘附分子的细胞称非专职APC.
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外源性抗原呈递过程

外源性抗原呈递过程外源性抗原经吞噬或吞饮作用，被APC摄入胞内形成吞噬体，后者与溶酶体融合形成吞噬溶酶体。抗原在吞噬溶酶体内酸性环境中被蛋白水解酶降解为小分子多肽，其中具有免疫原性的称为抗原肽。内质网中合成的MHC-Ⅱ类分子进入高尔基体后，由分泌小泡携带，通过与吞噬溶酶体融合，使抗原肽与小泡内MHC-Ⅱ类分子结合形成抗原肽-MHCⅡ类分子复合物。该复合物表达于APC表面，可被相应CD4+T细胞识别…
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抗原呈递细胞的概念

抗原呈递细胞的概念抗原呈递细胞(APC)是指能够摄取、加工处理抗原，并将处理过的抗原呈递给T、B淋巴细胞的一类免疫细胞。APC主要包括单核-吞噬细胞、树突状细胞、B细胞以及内皮细胞、肿瘤细胞的病毒感染的靶细胞等。
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超抗原

1.概念某些抗原物质只需极低浓度(1～10ng/ml)即可激活2%～20%的某些亚型的T细胞克隆，产生极强的免疫应答，但又不同于丝裂原的作用，这类抗原称为超抗原(SAg)。2.种类有两类：外源性超抗原和内源性超抗原。前者如金黄色葡萄球菌肠毒素A～E，后者如小鼠乳腺肿瘤病毒蛋白Mls.3.与普通抗原的区别(一)与MHCⅡ类分子α1和TCRVβ结构域结合，从而激活大量T细胞克隆，产生极强的免疫应答;(…
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中枢免疫器官

1.概念中枢免疫器官是免疫细胞发生、发育、分化和成熟的场所。2.组成中枢免疫器官包括骨髓、胸腺和禽类特有的法氏囊。骨髓可生成多能造血干细胞，是各种血细胞的发源地，也是人和哺乳动物B细胞及其他血细胞如单核-吞噬细胞、粒细胞、血小板和红细胞等发育、分化、成熟的场所。骨髓功能障碍，将严重损害机体的造血功能和免疫功能。胸腺是T细胞分化成熟的中枢免疫器官，来自骨髓始祖T细胞(胸腺细胞)可在其内发育分化成熟为…
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免疫细胞的概念

免疫细胞(IC)泛指所有参加免疫应答和与免疫应答有关的细胞及其前体细胞，包括造血干细胞、淋巴细胞、单核-吞噬细胞、粒细胞和红细胞等。造血干细胞(HSC)系存在于造血组织中的一群造血细胞，出生后骨髓成为HSC的主要来源，各种血细胞均来自HSC.CD34+、CD117+是HSC的主要标记。
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